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Conjugados de fármaco-anticuerpo (CFA): las balas mágicas para el tratamiento

Conjugados de fármaco-anticuerpo (CFA): las balas mágicas para el tratamiento
Antecedente
LISTA DE PRODUCTOS
OBJETIVOS DE CFA
PROTEASA
Conjugation kits
ANÁLISIS PK
SERVICIO
Antecedente

En los últimos años, los Conjugados de Fármacos de Anticuerpos (CFAs) pueden servir como una nueva modalidad terapéutica para muchos pacientes con cáncer. De hecho, tres elementos clave definen un CFA: el anticuerpo dirigido contra un antígeno tumoral específico, la citotoxina/carga útil y el enlazador escindible/no escindible que conecta la carga útil con el anticuerpo [1]. El reconocimiento de objetivos específicos y la toxina efectiva hacen que los CFAs sean una verdadera "bala mágica". Estas 'balas mágicas' brindan un tratamiento altamente específico y altamente potente, que busca y ataca a las células cancerosas en todo el cuerpo, al tiempo que evita dañar las células sanas.La selección razonable de los objetivos, el anticuerpo, el enlazador, la carga útil y sus combinaciones racionales, así como los métodos de conjugación, son cruciales para un tratamiento eficaz. Entre estos elementos, la selección del objetivo, la selección del enlazador, los métodos de conjugación y la evaluación de la eficacia preclínica/clínica se consideran factores críticos para el desarrollo de ADCs. >>> Descarga el libro electrónico: Punto clave del diseño de CFAs

Para satisfacer las necesidades de desarrollo de CFAs, ACROBiosystems puede proporcionar:
Una variedad de proteínas diana de alta calidad;
MMPs/Cathepsin/uPApara enlazador escindible;
Kits de conjugación específicos para el sitio de ADC;
Anticuerpos anti-carga, anticuerpos anti-idiotípicos (ADA) para el análisis de inmunogenicidad y PK.
Servicio de desarrollo de anticuerpos analíticos y antidiotípicos SPR/BLI.
Structure of ADCs
Todos los productos y servicios pueden cumplir con todo el proceso de los CFAs, desde la preparación de anticuerpos, la selección inicial, la producción hasta el control de calidad, lo que facilita el desarrollo de sus CFAs.
PRODUCTOS MÁS POPULARES
Proteínas diana CFA de alta calidad
ADC-related target proteins

Características

  1. 1. >> Más de 50 objetivos ADC, como Trop-2, Nectin-4,LIV-1 y ROR1;

  2. 2. >> Varias especies y etiqueta;

  3. 3. >> Alta pureza verificada por MALS;

  4. 4. >> Alta bioactividad verificada por ELISA/SPR/BLI/FACS, etc.

Aplicaciones

  • Adecuado para inmunización/detección de anticuerpos/reactividad cruzada/ensayo basado en células/control de calidad.

Productos Destacados

  • Proteínas LIV-1 exclusivas:

  • ✔ Múltiples especies: Humano, Ratón, Cynomolgus, Rata, etc.;

  • ✔ Las secuencias de expresión se diseñaron en base al epítopo de unión SGN-LIV1A.

Proteasas para conector peptídico
Cathepsin B, Proteases for peptide linker in ADCs

Características

  1. 1. >> Productos integrales: catepsina Cathepsin, MMPs y uPA etc.;

  2. 2. >> Conformación natural: HEK293 proteína manifestada para asegurar la estructura natural;

  3. 3. >> Alta actividad enzimática: actividad enzimática > 2.500 pmol/min/µg.

Aplicaciones

  • ✔ Evaluar el efecto de la escisión del enlazador por proteasas para asegurar la liberación eficiente de las cargas útiles intracelulares.

Herramientas para el análisis PK de CFAs
Anti-MMAE antibodies and anti-idiotypic antibodies for ADCs PK analysis

Características

  1. 1. >> Productos integrales: anticuerpos anti-MMAE y anticuerpos anti-idiotípicos;

  2. 2. >> Alta especificidad y afinidad;

  3. 3. >> Alta sensibilidad y estabilidad.

Aplicaciones

  • ✔ Referencia positiva de inmunogenicidad preclínica/clínica de CFAs;

  • ✔ análisis farmacocinético;

  • ✔ Anticuerpos de anti-carga útiles: Detección cualitativa del valor DCV.

Productos Destacados

  • La actividad del anticuerpo monoclonal anti-MMAE (Cat. No.MME-M5252) se verifica al unirse a Disitamab Vedotin (RC-48) con un rango lineal de 0,1-2 ng/mL.

SPR/BLI analytical & ADA development service
SPR /BLI analytical service

Servicio analítico SPR/BLI

  1. ● Proteínas ACRO suministradas gratuitamente
  2. ● Sólo se requieren sus muestras
  3. ● Los informes siguen todos los requisitos IND

    Aplicaciones

  • Basado en las plataformas Biacore 8K y ForteBio Octet, ACROBiosystems proporciona a los clientes de I+D biofarmacéutica servicios complementarios de análisis de interacciones moleculares, incluyendo el cribado de anticuerpos, la caracterización, la evaluación de la consistencia y las interacciones de biomoléculas que contribuyen al desarrollo terapéutico.
Anti-Idiotypic Antibody Development Service

Servicio de desarrollo de anticuerpos antidiotípicos

  1. ● Respuesta rápida, servicio individualizado
  2. ● Garantizar la entrega de kits de pruebas PK/ADA con sensibilidad
  3. ● Proteínas ACRO suministradas de forma gratuita

    Servicio

  • ✔ Kit de pruebas de anticuerpos monoclonales/poliotipos, farmacocinéticos e inmunogenéticos.

    • Aplicaciones

  • ✔ Ensayo ADA: Perfecto como calibrador;
  • ✔ Ensayo PK: Análisis cuantitativo del anticuerpo terapéutico en la matriz.

Lista de productos

  • Proteínas diana CFA

  • Proteasas para conector peptídico

  • AGLink™ ADC site-specific conjugation kits

  • Herramientas para el análisis PK de CFAs

Her2 HOTNectin-4 HOTTROP-2 HOTLIV-1  HOT NEWROR1 HOT NEWMesothelin HOTCEACAM-5 HOTEGF R HOTSiglec-2 HOTSiglec-3 HOTGUCY2C HOTErbB3FOLR1(FRα)NEWBCMA HOTCoagulation Factor III NEWPTK7 NEWLY75 NEWENPP3 NEWClaudin-18.2 NEWTIM-1 NEWALCAMAxlB7-H3CA125CD27 LigandCD19CD30CD37CD46CD48CD74CD79BDLL3EGFRvIIIEpCAMFlt-3HGF RIGF-I RIL-2 R alphaIL-3 R alphaLRRC15 NCAM-1PSMAROR2SLC1A5Syndecan-1TNF-alphaTPBGTRAIL R2Transferrin R
Molecule Cat. No. Product Description Preorder/Order
Molecule Cat. No. Product Description Preorder/Order

> Anti-Payload antibody

Molecule Cat. No. Product Description Preorder/Order

> Anti-Idiotypic Antibody

Molecule Cat. No. Product Description Neutralizing activity Application
Adalimu*ab ADB-Y19 Anti-Adalimu*ab Antibodies (AY19) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y10 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY10) (MALS verified, recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y12 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY12) (recommended for neutralizing assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y9 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY9) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-BY13 Biotinylated Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY13) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y27 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY27) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y31 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (Non-Neutralizing) Non-Neutralizing Antibody ADA assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y28 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY28) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-BY31 Biotinylated Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (recommended for PK/PD) Non-Neutralizing Antibody PK bridging ELISA; Indirect ELISA
Rituxi*ab RIB-Y36 Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY36) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*ab RIB-Y37 Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY37) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA;Neutralizing assay;Indirect ELISA
Trastuzu*ab TRB-Y5b Anti-Trastuzu*ab Antibodies (AY5b) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA
Proteínas diana CFA de alta calidad
TROP-2
                   
Nectin-4
                   
EGFR
                   
Her2
                   
CEACAM-5
                   
CD79B
                   
PSMA
                   
Claudin18.2
                   
FOLR1
                   
Siglec-3
                   
BCMA
                   
Siglec-2
                   
CD19
                   
CD30
                   
DLL3
                   
PTK7
                   
TF
                   
TF
                    
ROR1
                   
ENPP3
                   
LIV-1
                   
HGFR
                   
NCAM-1
                   
EGFRvIII
                   
CD133
                   
LY75

Caso de estudio

Alta pureza verificada por MALS
HER2, MALS-validated protein

The purity of Human Her2, His Tag (Cat. No. HE2-H5225) was more than 90% and the molecular weight of this protein is around 80-95 kDa verified by SEC-MALS.

Alta afinidad validada por ELISA
HER2 protein's affinity verified by ELISA

Immobilized Human TROP-2, His Tag (Cat. No. TR2-H5223) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Mouse Monoclonal Antibody Against Human TROP-2, Mouse IgG1 with a linear range of 0.1-2 ng/mL (QC tested).

PSMA protein's affinity verified by ELISA

Immobilized Human PSMA, His Tag (Cat. No. PSA-H52H3) at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Human PSMA Antibody, Human IgG1 with a linear range of 0.3-39 ng/mL (Routinely tested).

Alta afinidad validada por SPR
LIV-1 protein's affinity verified by SPR

Anti-LIV-1 mAb captured on CM5 chip via anti-human IgG Fc antibody can bind Human LIV-1, His Tag (Cat. No. LV1-H5223) with an affinity constant of 5.24 nM as determined in a SPR assay (Biacore T200) (Routinely tested).

HER2 protein's affinity verified by SPR

Trastuz*mab captured on CM5 chip via anti-human IgG Fc antibodies surface, can bind Human Her2, His Tag (Cat. No. HE2-H5225) with an affinity constant of 1.07 nM as determined in a SPR assay.

High affinity validated by BLI
Nectin-4 protein's affinity verified by BLI

Loaded Mouse Nectin-4, His Tag (Cat. No. NE4-M52H3) on HIS1K Biosensor, can bind Human Nectin-1, Fc Tag (Cat. No. PV1-H5253) with an affinity constant of 0.12 μM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) (Routinely tested).

High affinity validated by FACS
ROR1 protein's affinity verified by BLI

2e5 of anti-ROR1 CAR-293 cells were stained with 100 μL of 10 μg/mL of Human / Cynomolgus / Rhesus macaque ROR1 (39-151, Ig-like domain), His Tag (Cat. No. RO1-H5221) and negative control protein respectively, washed and then followed by PE-anti-His Tag and analyzed with FACS (Routinely tested).

Proteasas para conector peptídico
En el diseño y desarrollo de CFA, el enlazador afecta la estabilidad de los CFAs en la circulación sistemática, la velocidad del procesamiento lisosomal, etc. Hay dos categorías principales de enlazadores CFA en los fármacos CFA actuales, enlazadores escindibles y enlazadores no escindibles.
El conector peptídico como conector escindible sensible a la proteasa se utiliza en la mayoría de los CFAs que se someten a pruebas clínicas. En el diseño del conector peptídico, es necesario considerar la selección de una proteasa adecuada para la escisión del conector, como por ejemplo:MMPs/Cathepsin/ PLAU [2].
Por lo tanto, ACROBiosystems ha desarrollado una serie de productos de proteína MMP, catepsina y uPA para la escisión de Linker.
More anti-payload antibodies (Anti-Dxd antibody/Anti-SN-38 antibody/Anti-SN-38 antibody) are coming soon！
Mechanisms of action of ADCs

Caso de estudio

Products Cat. No.CTB-H5222 Human Cathepsin B / CTSB Protein, His Tag (active enzyme) Cat. No.MM9-H5221 Human MMP-9 Protein, His Tag (active enzyme)
Hydrolyzed substrate Fluorogenic peptide substrate Z-LR-AMC Fluorogenic peptide substrate Mca-PLGL-Dpa-AR-NH2
Enzymatic activity
（pmol/min/μg）		 > 2500 > 2500
Kits de conjugación específicos para el sitio de la ADC
Los métodos de conjugación se dividen generalmente en conjugación aleatoria y conjugación específica para el sitio. La conjugación aleatoria puede causar varios problemas, como un índice terapéutico subóptimo, ventanas terapéuticas más estrechas y una estabilidad deficiente. Las conjugaciones específicas de sitio están diseñadas para superar la heterogeneidad observada con las ADC que utilizan la conjugación aleatoria a los residuos de lisina expuestos en la superficie o la conjugación a los enlaces disulfuro entre cadenas. La conjugación de sitios específicos puede controlar con precisión los sitios de conjugación, produciendo una mezcla homogénea que proporciona ADCs de mayor potencia. Las características de los distintos métodos de conjugación aplicados a los ADCs
The characteristics of various conjugation methods applied for ADCs
The characteristics of various conjugation methods applied for ADCs[3]
Los kits de conjugación específica para el sitio de AGLink ADC son desarrollados conjuntamente por ACROBiosystems y Glyco-therapy Biotechnology Co., Ltd. basados en la plataforma de conjugación (YTConjuTM) propiedad de Glyco-therapy Biotechnology Co., Ltd.[4]. AGLink permite la modificación enzimática de los glicanos Fc de las IgG que dan lugar a conjugados homogéneos, que pueden utilizarse para la investigación científica temprana de los ADC..
Investigación y orden

Mecanismo de conjugación

Todos los anticuerpos monoclonales están glicosilados en (o alrededor de) la asparagina 297 (N297). La especificidad del sitio inherente a la glicosilación Fc hace que la glicoingeniería sea reconocida como un enfoque universal y eficiente para sintetizar conjugados de anticuerpos homogéneos. Los diagramas esquemáticos son los siguientes[4]：
AGlink ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR4)
AGlink ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR4)
AGlink ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2)
AGlink ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2)

Datos de ensayo

Anticuerpos conjugados de alta homogeneidad
HIC-HPLC analysis of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)

HIC-HPLC analysis of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)

Inmunorreactividad conservada tras la conjugación
The analysis of the antigen-binding capacity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)

The analysis of the antigen-binding capacity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2), the results showing that binding to the HER2 antigen unaffected by the AGLink conjugation

La consistencia en el proceso de etiquetado específico del sitio asegura mitigar la agregación
Less than 5% of antibody aggregation by SEC-HPLC

Less than 5% of antibody aggregation by SEC-HPLC

Los conjugados tienen una alta estabilidad plasmática in vitro
The conjugates have high in-vitro plasma stability

MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2) are stable in human plasma in vitro

Ensayo de actividad celular in vitro
In-vitro cell-killing activity assay

Validated in-vitro cell-killing activity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)

Análisis PK
Al respaldar el análisis de inmunogenicidad y PK, ACRO proporciona una serie de anticuerpos anti-MMAE y anticuerpos anti-idiotípicos con alta afinidad, alta especificidad y alta sensibilidad.
Utilizado para la referencia positiva de inmunogenicidad preclínica/clínica de CFAs y análisis PK;
Ahorre tiempo al cliente para preparar anticuerpos;
Los protocolos completos de la metodología están disponibles gratuitamente.

Caso de estudio

Ensayo PK: Anticuerpo anti-MMAE que se une a MMAE con alta especificidad
Anti-MMAE antibody binding MMAE with high specificity

The EC50 value of anti-MMAE antibody to MMAE-conjugated hRS7 (MMAE-ADC) was 0.12 μg/ml. The unconjugated hRS7 antibody was used as negative control

Anti-MMAE antibody binding MMAE-ADC with high specificity

Immobilized Disitamab Vedotin (RC48) at 0.2 μg/mL (100 μL/well) can bind Mouse Anti-MMAE Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. MME-M5252) with a linear range of 0.1-2 ng/mL (QC tested).

Ensayo PK: Detección específica de niveles de fármacos de anticuerpos en el cuerpo
PK assay for ADCs: Specific detection of antibody drug levels in the body
Detection of Ritux*mab by antigen-capture ELISA (0.1% serum).
PK assay for ADCs: Specific detection of antibody drug levels in the body
Detection of Ritux*mab by anti-idiotypic capture ELISA (0.1% serum).
PK assay for ADCs: Specific detection of antibody drug levels in the body
Detection of Ritux*mab by anti-idiotypic bridging ELISA (10% serum).
Method Coated Sample Linear range
(µg/mL)		 Sensitivity
(µg/mL)		 Advantage
Antigen capture ELISA CD20 Goat anti-human IgG — — Simple and universal method
Anti-idiotypic capture ELISA Anti-Ritux*mab Antibodies Goat anti-human IgG 0.156-10 0.156 It is a simple method for extracting CD20
Bridging ELISA by anti-idiotypic antibodies Anti-Ritux*mab Antibodies Biotinylated Anti-Ritux*mab Antibodies 0.012-0.78 0.012 CD20 can be obtained with good sensitivity and low background noise
Comparación entre ELISA de captura antiidiotípica y elisa puente antiidiotípica para la detección de Ritux*mab en muestras de pacientes
Servicio analítico SPR/BLI y servicio de desarrollo de anticuerpos antiidiotípicos
Además, gracias a un equipo muy capaz y altamente profesional, ACROBiosystems también ofrece a los clientes un servicio analítico SPR&BLI integrado de alta calidad y servicios integrales sobre anticuerpos antiidiotipo monoclonales/policlonales, lo que facilita el desarrollo de CFAs.
Servicio analítico SPR/BLI
Cooperó con cientos de usuarios de investigación industrial y científica;
Proteínas ofrecidas gratis;
Sistema de control de gestión de calidad de alto estándar;
Informes al día siguiente a la mayor brevedad;
Admite más de 300 medicamentos hasta aplicaciones clínicas.
SPR/BLI analytical in ADCs
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Servicio de desarrollo de anticuerpos antiidiotípicos
Proteínas ACRO suministradas de forma gratuita;
Respuesta rápida, servicio uno a uno del equipo del proyecto, seguimiento en tiempo real;
Proporcionar un servicio integral desde la preparación del antígeno hasta el desarrollo del kit de detección;
Entrega garantizada de reactivos de detección PK/ADI cuya sensibilidad cumple con los requisitos reglamentarios.
Anti-idiotypic antibody development service in ADCs
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Referencia:

[1]Criscitiello C, et al. Antibody-drug conjugates in solid tumors: a look into novel targets. J Hematol Oncol. 2021 Jan 28;14(1):20.

[2]Poreba M. Protease-activated prodrugs: strategies, challenges, and future directions. FEBS J. 2020 May;287(10):1936-1969.

[3] Antibody drug conjugate: the “biological missile” for targeted cancer therapy

[4] Reducing the Complexity of Fc Glycan Enables the Construction of Antibody Conjugates with Unexpected High Efficiency and Payload Capacity via Glycoengineering

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