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Enzimas para la caracterización exhaustiva de anticuerpos

Enzimas para la caracterización exhaustiva de anticuerpos
Introduction
Lista de Productos
Herramientas para el análisis de glicanos
Fragmentación de subunidades de anticuerpos
Introduction
Los anticuerpos terapéuticos utilizados como biofármacos son moléculas muy complejas que requieren un seguimiento y un control estrictos durante su fabricación. Debido a su naturaleza de fármaco biológico, la seguridad del medicamento y la variación innata de los métodos de producción son siempre motivo de preocupación. Por lo tanto, para analizar y caracterizar la calidad del producto se deben aplicar una serie de flujos de trabajo para una caracterización analítica exhaustiva y en profundidad.
La caracterización de los Abs suele realizarse desde varias perspectivas, empezando por el análisis top-down (estructura general), pasando por el análisis bottom-up (secuenciación peptídica) y, por último, el análisis de nivel medio (Fc, Fv, PTMs).
Para facilitar los métodos de caracterización de anticuerpos, ACROBiosystems ha desarrollado una serie de enzimas para ayudar a la caracterización de anticuerpos y sus PTMs relacionados.
Lista de Productos
Product DetailsCat. No.Unit Definition
Endo H (500U/μl)ENH-S5116One unit is defined as the amount of enzyme required to remove >95% of the carbohydrate from 10µg of denatured RNase B in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 10µl.
Endo S (200U/μl)ENS-S5143One unit deglycosylates ≥ 95% of 1 μg human IgG, when incubated in 10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH7.4 at 37°C for 30 min.
SpeB (40U/μl)SPB-S5115One unit digests ≥ 95% of 1 µg human IgG1 when incubated in PBS ith 5 mM DTT or TCEP, pH 7.4 at 37°C for 1 hour.
IdeS (20U/μl)IDS-S5143One unit digests ≥ 95% of 1 μg human IgG when incubated in 10 mM sodium phosphate, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH7.4 at 7°C for 30min.
Herramientas para el análisis de glicanos
Herramientas para el análisis de glicanos
La estructura y el tipo de los glicanos ligados al N pueden afectar a la inmunogenicidad, la farmacocinética y la farmacodinámica de proteínas terapéuticas como los anticuerpos monoclonales (mAbs) y las proteínas de fusión Fc. Enzimas como Endo H y Endo S proporcionan escisiones específicas de tipo de glicanos ligados a N para su posterior análisis.

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

Aplicación:

Endo H escinde oligosacáridos híbridos o con alto contenido en manosa ligados a asparagina (ligados a N), pero no oligosacáridos complejos.
Desdoblamiento de N-glicanos con alto contenido en manosa o híbridos
 
 

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

Características del Producto:

Acción selectiva: No escinde glicanos complejos
pureza ≥95%, determinada por SDS-PAGE  
PH óptimo: 5-6
Tiempo de reacción: 1 h

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

Aplicación:

Endo S escinde preferentemente oligosacáridos complejos y evita la escisión de oligosacáridos híbridos o con alto contenido en manosa ligados a asparagina (ligados a N).
Desdobla glicanos complejos, actividad limitada en glicanos de alto contenido en manosa y de tipo híbrido.

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

Características del Producto:

Endoglicosidasa específica de IgG altamente eficaz
pureza ≥95% determinada por SDS-PAGE
Tiempo de reacción: 30 min
Fragmentación de subunidades de anticuerpos

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

Aplicación:

La enzima SpeB digiere la IgG para generar fragmentos Fab y Fc. Los fragmentos Fab purificados y homogéneos pueden utilizarse en muchas aplicaciones, entre ellas:
Estudio de la unión monovalente de los fragmentos Fab al antígeno.
Eliminación de las funciones efectoras mediadas por Fc.
Reducción de la unión inespecífica de las interacciones Fc.
 

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

Características del Producto:

Sitio de escisión (IgG1 humana): KTHT / CPPCPAP (por encima de la bisagra)
Tiempo de reacción: 60 min

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

Aplicación:

La proteasa IdeS escinde específicamente las IgG por debajo de la región bisagra en fragmentos F(ab')2 y Fc.

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

Características del Producto:

Sitio de escisión (IgG1 humana): CPAPELLG / GPSVF (debajo de la bisagra)
Tiempo de reacción: 30 min
 
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