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Productos etiquetados con fluorescencia Star Staining
Herramientas de nueva generación para la detección del RAQ

Star Staining-Fluorescent-labeled Products
Introducción
Los productos con etiquetas fluorescentes Star Staining se desarrollan mediante una tecnología de nueva generación de etiquetado específico del sitio con calidad "Star Standard" en ACROBiosystems. Estos productos están diseñados exclusivamente para detectar y controlar las células RAQ-T en ensayos clínicos.
La proteína marcada con fluorescencia es una poderosa herramienta para la detección de la expresión de RAQ en muestras clínicas y de investigación mediante citometría de flujo. Estas proteínas son colorantes fluorescentes premarcados que pueden detectar la expresión de RAQ mediante una tinción de un solo paso con un fondo mínimo. Sin embargo, el desarrollo de proteínas marcadas con fluorescencia de alta calidad presenta un desafío importante y, hasta el momento, solo hay unos pocos productos disponibles comercialmente.
La técnica de conjugación es el mayor cuello de botella para desarrollar proteínas marcadas con fluorescencia de alta calidad. Actualmente, la técnica de etiquetado más utilizada en el mercado es el enfoque tradicional de etiquetado químico. Es un método muy fácil de etiquetar covalentemente la proteína con un tinte fluorescente de manera no específica. Sin embargo, la modificación aleatoria puede dar lugar a heterogeneidad y puede afectar a la bioactividad de la proteína mediante el bloqueo del sitio activo de la proteína. Los estudios indican que la tecnología de nueva generación de marcaje específico del sitio puede unir tintes fluorescentes a proteínas específicas de manera específica en lugares determinados. Proporciona una garantía a la uniformidad de los productos marcados con fluorescencia y evita afectar la actividad de la proteína. Esta propiedad lo convierte en un arma útil para el desarrollo de productos proteínicos marcados con fluorescencia de alta calidad con alta especificidad y sensibilidad.
Característica de producto
Etiquetado químico tradicional
Traditional Chemical Labeling
Etiquetado aleatorio no selectivo y afecta la estructura natural
Puede cubrir los sitios activos para reducir la bioactividad
Fácil de agregar debido al cambio de hidrofilia de las proteínas
Alta variación en la consistencia de lote a lote
Etiquetado de nueva generación específico del sitio
New-generation Site-specific Labeling
El marcaje ocurre en la etiqueta específica y lejos de los sitios activos de las proteínas.
Mantener la conformación y modificación natural.
Tecnología eficientemente bio-ortogonal
Alta consistencia y uniformidad de lote a lote.
Características de Star Staining

ACROBiosystems se esfuerza por desarrollar reactivos de detección de alto estándar para apoyar el desarrollo de la terapia con células RAQ-T. Después de años de investigación y experiencia por parte de nuestros técnicos, establecimos con éxito la plataforma de etiquetado específica del sitio "Star Staining" y desarrollamos una serie de proteínas exclusivas marcadas con fluorescencia con calidad "Star Standard". Los productos de "Star Staining" pueden ser herramientas poderosas para detectar y monitorear las células RAQ-T en ensayos clínicos.

Uso de tecnología de etiquetado específica del sitio de nueva generación para mantener la bioactividad natural

Alta especificidad y sensibilidad verificadas por citometría de flujo

Sin unión no específica a PBMC no transducidas

Alta consistencia y uniformidad de lote a lote

Productos Más Productos
  • FITC

  • PE

  • APC

  • Alexa Fluor 647

  • Alexa Fluor 555

  • Alexa Fluor 488

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Visualización de datos

Alta pureza

Mayor pureza del 90% de Star Staining de BCMA humano etiquetado FITC
BCMA SDS-PAGE

FITC-Labeled Human BCMA, His Tag (Cat. No. BCA-HF2H3) on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 90%.

BCMA SEC-MALS

The purity of FITC-Labeled Human BCMA, His Tag (Cat. No. BCA-HF2H3) is more than 90% and the molecular weight of this protein is around 24-34 kDa verified by SEC-MALS.

Alta bioactividad

Mayor actividad vinculante que la de otros competidores
BCMA binding activity verified by FACS
CD19 binding activity verified by FACS

Binding activity of FITC-Labeled Human BCMA and CD19 protein from two different vendors were evaluated by the FACS analysis. The result showed that ACRO's Star Staining FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) and CD19 (Cat. No. CD9-HF2H3) protein have a much higher binding activity than that of the other competitor.

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Alexa Fluor 647-Labeled Human Mesothelin (296-580)

The activity of Alexa Fluor 647-Labeled Human Mesothelin (296-580), His Tag (Cat. No. MSN-HA2H5) was higher than other Competitor.


Alexa Fluor 488-Labeled Human Mesothelin / MSLN (296-580) Protein

The activity of Alexa Fluor 488-Labeled Human Mesothelin (296-580), His Tag (Cat. No. MSN-HA2H9) was higher than other Competitor.

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Star Staining PE-CD19 o proteína APC-CD19 pueden detectar la expresión de CD19 RAQ con alta sensibilidad mediante citometría de flujo.
APC-CD19 FACS binding activity verified by FACS

Anti-CD19 CAR-293 cells were stained with PE-Labeled Human CD19 (20-291) Protein (Cat. No. CD9-HP2H5), His Tag star staining and negative control protein respectively, PE signal was used to evaluate the binding activity.

PE-CD19 binding activity verified by FACS

Anti-CD19 CAR-293 cells were stained with APC-Labeled Human CD19 (20-291) Protein (Cat. No. CD9-HA2H9), His Tag star staining and negative control protein respectively, APC signal was used to evaluate the binding activity.

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Unión no específica a PBMC no transducidas

Los productos Star Staining no se unen de forma no específica a las PBMC no transducidas con una actividad de unión más alta que la de otros competidores.
BCMA-PBMC  verified by FACS

Non-specific binding to non-transduced PBMCs between PE-Labeled Human BCMA Protein of Acro and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with PE -Labeled Human BCMA Protein and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. FITC signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and PE signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

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BCMA PBMC comparison Data

Non-specific binding to non-transduced PBMCs between FITC-Labeled Human BCMA Protein of Acro and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with FITC-Labeled Human BCMA Protein and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. PE signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and FITC signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

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Mantener la bioactividad natural

Alta capacidad de unión antes y después de la conjugación, verificada por FACS y SPR
BCMA bioactivity verified by FACS

Binding activity of the Human BCMA before and after FITC labeling was evaluated in the above FACS analysis. The result shows that FITC-Labeled BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) and unconjugated Human BCMA have almost the same level of binding activity.

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BCMA binding affinity  verified by SPR
FITC-BCMA binding affinity  verified by SPR

Binding affinity of the Human BCMA before and after FITC labeling was evaluated in the above SPR analysis (Biacore T200). The result shows that FITC-Labeled (Cat. No. BCA-HF2H3) and unconjugated Human BCMA, His Tag have almost the same level of affinity.

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Alta consistencia entre lotes

FACS verificó la actividad de unión de diferentes lotes de proteína BCMA humana marcada con FITC/Alexa Fluor-555/PE
FITC-BCMA batch-to-batch consistency verified by FACS
AF555-BCMA  batch-to-batch consistency verified by FACS
PE-BCMA batch-to-batch consistency verified by FACS

Binding activity of different lots of FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) , AF555-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HA2H6) and PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) against anti-BCMA CAR-293 cells was evaluated by flow cytometry. The result shows very high batch-to-batch consistency.

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Alta estabilidad

PE-BCMA stability verified by FACS
FITC-BCMA stability verified by FACS

PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) and FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3)  25℃ for 48 hours and freeze-throw cycles are stable without performance reduction.

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REFERENCIAS

[1] Abbasov ME, Kavanagh ME, Ichu TA, et al. A proteome-wide atlas of lysine-reactive chemistry [published online ahead of print, 2021 Sep 9]. Nat Chem. 2021;10.1038/s41557-021-00765-4.

[2] Xu L, Kuan SL, Weil T. Contemporary Approaches for Site-Selective Dual Functionalization of Proteins. Angew Chem Int Ed Engl. 2021;60(25):13757-13777.

[3] Devabhaktuni A, Lin S, Zhang L, et al. TagGraph reveals vast protein modification landscapes from large tandem mass spectrometry datasets. Nat Biotechnol. 2019;37(4):469-479.

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