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> Factores de crecimiento para el cultivo de células madre pluripotentes inducidas
Cancers 2022, 14, 2266
célula iPSC-T
El enfoque clásico para generar células T derivadas de iPSC parte de:
1. Co-cultivo de iPSCs derivadas de donantes sanos con línea celular estromal de médula ósea murina (C3H10T1/2 u OP9) para generar células progenitoras hematopoyéticas CD34+.
2. Los progenitores hematopoyéticos se enriquecen y cocultivan con la línea celular OP9 que sobreexpresa DLL-1/DLL-4, con citoquinas adicionales para impulsar la diferenciación de células T.
células iPSC-NK
Generar células NK derivadas de iPSC:
1. Las iPSCs derivadas de donantes sanos se cocultivan con la línea celular estromal de médula ósea murina M210-B4 durante ~20 días para permitir la generación de progenitores hematopoyéticos CD34 +.
2. A continuación, los progenitores hematopoyéticos CD34 + se enriquecen y cocultivan con una monocapa de AFT024 murino (una línea celular estromal derivada del hígado fetal) o células del estroma EL08-1D2 con citoquinas definidas durante 4 a 5 semanas, generando finalmente células NK maduras.
iPSC-Macrófagos
La formación de macrófagos Mφs derivados de iPSC requiere una metodología más compleja:
1. La formación de cuerpos embrioides (EBs) es el método más comúnmente utilizado para la diferenciación de Mφs derivadas de iPSC, utilizando modificaciones específicas como la suspensión rotatoria, enfoques de micropocillos, chips microfluídicos de gota colgante, y otros.
2. Tras la formación de EBs derivadas de iPSC, las Mφs mieloides se inducen aún más mediante la suplementación de citoquinas, incluyendo GM-CSF, M-CSF, IL-3 e IL-4.
Estéril
Libre de Origen Animal
Alta Pureza ≥95%
Alta Bioactividad Verificada por Ensayo Celular
ActiveMax®, grados Premium y GMP disponibles
Baja endotoxina ≤0.1 EU/µg
Sin portador
Similar a Conformación natural y modificaciones
Consistencia entre lotes
Las citoquinas son materias primas fundamentales utilizadas en el cultivo de células para los medicamentos de terapia celular y génica (CGT). Por lo general, en la fase preclínica no se prioriza ni la seguridad ni la calidad de las materias primas. En este caso, se pueden utilizar productos de uso exclusivo para la investigación. Sin embargo, cuando se pasa a fases posteriores de desarrollo de fármacos, como la CMC o la clínica, es necesario sustituir las materias primas por materiales de grado GMP para cumplir con las directrices reglamentarias. En este período de transición, se dedica una gran cantidad de energía a reevaluar y validar nuevas materias primas.
Para facilitar esta transición del desarrollo preclínico a la etapa clínica, ofrecemos varios grados de citoquinas que han sido evaluados para ser casi idénticos en bioactividad, junto con la documentación requerida de los productos GMP. Recomendamos el uso de nuestras materias primas de primera calidad en la fase inicial de desarrollo para pasar sin problemas a nuestras materias primas de grado GMP al entrar en las fases CMC o clínica y minimizar el número de estudios de reevaluación y validación realizados.
GMP Human IL-15 Protein on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human IL-2, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human VEGF165, premium grade (Cat. No. VE5-H4210) stimulates proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The ED50 for this effect is 4.216-9.281 ng/mL.
Human IL-2, premium grade (Cat. No. IL2-H5215) stimulates proliferation of CTLL-2 cells. The EC50 for this effect is 1.996 ng/mL, corresponding to a specific activity of 5 ⅹ10^6 IU/mg, which is calibrated against Interleukin-2 (Human, rDNA derived) (2nd International Standard) (NIBSC code: 86/500).
Immobilized Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade (Cat. No. DL4-H5259) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Human DLL4 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 1-16 ng/mL.
Laminin 521 (LA5-H5261) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
Laminin 511 (LA8-H5283) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
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