Anticuerpo monoclonal específico de CAR para detectar la expresión de CAR anti-CD19

El CD19 es actualmente el objetivo más utilizado en la terapia CAR-T, que ha sido validado como eficaz y seguro para tratar la B-ALL, la CLL y el linfoma de células B. FMC63 es un anticuerpo monoclonal de ratón IgG2a dirigido al CD19. Hasta el momento, la mayoría de los ensayos CART19 notificados contienen el scFv anti-CD19 derivado de FMC63, incluyendo los dos CARs Kymriah y Yescarta aprobados por la FDA.

Aunque los resultados terapéuticos de las células CAR-T específicas de CD19 han sido impresionantes, el control de calidad durante la fabricación de la terapia sigue siendo un área en la que se requieren más avances. Nuestras  proteínas CD19 de alta afinidad pueden detectar eficazmente la expresión de CAR anti-CD19 en la superficie de las células T transducidas, y han sido ampliamente reconocidas por su alta sensibilidad y especificidad. Estas proteínas CD19 de alta afinidad se han utilizado ampliamente para las pruebas de liberación de control de calidad y el estudio farmacocinético (PK) de las células CAR-T anti-CD19 en los ensayos clínicos.

Después de recibir una respuesta positiva sobre las proteínas CD19 de alta afinidad en el mercado, ACROBiosystems ha desarrollado ahora un anticuerpo antiidiotipo contra FMC63 scFv, denominado Anticuerpo Monoclonal Anti-FMC63 scFv, que puede reconocer específicamente el dominio de reconocimiento de antígeno de los CARs anti-CD19 derivados de FMC63 con alta sensibilidad y alta especificidad. El rendimiento del anticuerpo monoclonal scFv anti-FMC63 fue validado por citometría de flujo (FCM) en casa y es adecuado para detectar CARs anti-CD19 derivados de FMC63 en ensayos clínicos.

Acerca del anticuerpo anti-FMC63 de calidad superior

Está diseñado para aplicaciones de aislamiento y cultivo celulares, y se produce en condiciones de fabricación sin animales. En todo el proceso de producción no se utilizan componentes de origen animal. Se produce bajo nuestro riguroso sistema de control de calidad, que incorpora un amplio conjunto de pruebas, incluidas las de esterilidad y endotoxinas. El rendimiento del producto se valida cuidadosamente y se comprueba su compatibilidad para el uso en cultivos celulares o cualquier otra aplicación en la fase preclínica temprana.

No hay tinción de fondo cuando se detectan CARs Anti-CD19 derivados de FMC63 en ensayos clínicos

Detection of Anti-CD19 (FMC63) CAR Expression

2e5 of FMC63 scFv-based anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 µL of the working solution of Monoclonal AntiFMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) and isotype control respectively, washed and then followed by PE anti-mouse IgG1 Antibody and analyzed with flow cytometry (QC tested).

Protocol

Assessment of Non-specific Binding to 293 Cells

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected 293 cells was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected 293 cells.

Protocol

Assessment of Non-specific Binding to PBMCs

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected human PBMCs was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected human PBMCs.

Protocol

Reconocer específicamente el sitio de unión al antígeno de los CARs derivados de FMC63 con alta afinidad

Binding Activity and Specificity Measured by ELISA

Immobilized FMC63 scFv, His Tag at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45) with a linear range of 1-19 ng/mL. Anti-DNP antibody, mouse IgG1 (Cat. No. DNP-M1) was used as an isotype control (QC tested).

Protocol

Neutralizing Activity Measured by ELISA

ELISA analysis shows that the binding of Human CD19, Fc Tag (Cat. No. CD9-H5251) to FMC63 scFv, His Tag was inhibited by increasing concentration of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45). The concentration of Human CD19, Fc Tag used is 5 μg/mL (100 μL/well). The IC50 is 0.084 μg/mL (Routinely tested).

Protocol

High Affinity Determined by SPR

Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface can bind FMC63 scFv with an affinity constant of 1.08 nM as determined in a SPR assay.

Protocol

Lista de productos de proteínas CD19 de alta afinidad

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