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La caracterización y la evaluación farmacocinética (PK)/PD son vitales. Los atributos de calidad, como la especificidad del antígeno, la afinidad y las tasas de activación y desactivación, la avidez (en el caso de los anticuerpos biespecíficos que se dirigen a dos moléculas de la misma célula), la potencia, las impurezas relacionadas con el proceso, como los agregados, los fragmentos y los homodímeros, la estabilidad y la vida media, pueden afectar a la farmacología y deben estudiarse. Por otra parte, como los anticuerpos biespecíficos pueden presentarse como una mezcla de formas biológicamente activas e inactivas, es importante identificar la(s) forma(s) de anticuerpos biespecíficos que sea(n) más relevante(s) farmacológicamente para la evaluación de la PK/PD y desarrollar ensayos validados que midan la(s) forma(s) apropiada(s). Debido al efecto sinérgico que aporta el BsAb, la dosis es relativamente baja. Por lo tanto, requiere un ensayo más sensible para su análisis.
Fig 1. Immobilized Human CD3E&CD3D Heterodimer Protein, His Tag&Tag Free (Cat. No. CDD-H52W1) at 2 μg/mL, add increasing concentrations of Bispecific T cell Engager (CD3 X BCMA) and then add Biotinylated BCMA Fc,Avitag (Cat. No. BC7-H82F0) at 0.2 μg/mL. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with sensitivity of 4 ng/mL.
Fig 2. Binding assay between bsAb and Fc receptor
Fig 3. Immobilized Human OX40 Protein, His Tag (MALS verified) (Cat. No. OX0-H5224) at 2 μg/mL, add increasing concentrations of CTLA-4 x OX40 bispecific antibody in 50% Human serum and then add Biotinylated Human CTLA-4, Fc,Avitag (Cat. No. CT4-H82F3) at 0.2 μg/mL. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with sensitivity of 4 ng/mL (Intact assay)
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