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> AGLink® Kit de conjugación de sitio-específico
El método de conjugación elegido para los fármacos conjugados basados en anticuerpos desempeña un papel fundamental en la determinación de la relación anticuerpo-fármaco (DAR) y la uniformidad del producto resultante, lo que repercute directamente en su eficacia, tolerabilidad y estabilidad.
Los métodos de conjugación se suelen clasificar como aleatorios o específicos de un lugar. Cada vez se prefiere más la conjugación en sitios específicos por su capacidad de producir fármacos conjugados de gran uniformidad y perfiles de seguridad mejorados.
Casi todos los anticuerpos monoclonales están glicosilados en (o alrededor de) Asn-297 del dominio Fc. La conjugación mediada por glicanos, un método de sitio específico bien establecido, utiliza los sitios de glicosilación N297 del anticuerpo para la conjugación.
Al estar alejada de la región de unión al antígeno, la conjugación en este lugar preserva la función de unión del anticuerpo, minimizando el riesgo de comprometer su capacidad de unión al antígeno tras la conjugación. Este método elimina la necesidad de realizar modificaciones en la ingeniería de anticuerpos, lo que aumenta la comodidad, la versatilidad y agiliza significativamente la eficiencia en las primeras fases de la investigación.
En colaboración con Glyco-Therapy Biotechnology Co., Ltd., hemos desarrollado el kit de conjugación AGLink® DAR2&4 sitio-específico. Basado en la plataforma de conjugación YTConju™ de Glyco-therapy, el kit facilita la conjugación eficiente de varias cargas útiles, incluyendo toxina (MMAE), grupos funcionales reactivos (Tz/DBCO) y etiquetas de detección (Biotina). Diseñado para potenciar la investigación en fases tempranas y los experimentos biológicos en el campo de los fármacos conjugados.
Método de un solo recipiente y un solo paso
Kits DAR 2 o DAR 4 disponibles con un kit (this is redundant. I suggest removing it)
Alcanzar valores DAR uniformes de la noche a la mañana dentro de 24 horas (I will suggest removing the phrase “de la noche a la mañana”).
Haga clic en química lista
Productos homogéneos y estables tras la conjugación
Diferentes tipos de kits de conjugación
For DAR4 Conjugation
For DAR2 Conjugation
Toxina
Grupo funcional reactivo
Etiqueta de detección
Conjugación con MMAE para el cribado de anticuerpos, preparación y estudios de rendimiento en el campo de las ADC.
HIC-HPLC analysis of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
The analysis of the antigen-binding capacity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2), the results showing that binding to the HER2 antigen unaffected by the AGLink conjugation
Less than 5% of antibody aggregation by SEC-HPLC
MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2) are stable in human plasma in vitro
Validated in-vitro cell-killing activity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
DBCO: El DBCO reacciona con moléculas que contienen N3 en la Química Click, aumentando la hidrofilicidad de las moléculas modificadas.
Tetrazina: La tetrazina, reactiva con grupos funcionales BCN o TCO, demuestra una reactividad superior, lo que la hace más adecuada para conjugar moléculas complejas.
La utilización de reacciones de química de clic permite la conjugación de una gran variedad de moléculas, como toxinas, tintes fluorescentes, oligonucleótidos, nanocuerpos, etc.
Cribado y preparación de anticuerpos para detección o diagnóstico
Productos más homogéneos, y mayor consistencia entre lotes en comparación con el etiquetado químico tradicional
| Molecule | Cat. No. | Product Description | Preorder/Order |
|---|---|---|---|
| MMAE | ADC-P005 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 1mg) | |
| Tetrazine | ADC-P006 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 1mg) | |
| DBCO | ADC-P007 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 1mg) | |
| Biotin | ADC-P008 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 1mg) | |
| MMAE | ADC-P009 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 5mg) | |
| Tetrazine | ADC-P010 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 5mg) | |
| DBCO | ADC-P011 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 5mg) | |
| Biotin | ADC-P012 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 5mg) |
1. ¿Cuál es la cantidad mínima de anticuerpo adecuada para el kit de conjugación AGLink?
El requisito mínimo es de 200 μg, con una tasa de recuperación esperada superior al 85%. Para acomodar esta cantidad, reduzca proporcionalmente los reactivos de la reacción según el protocolo proporcionado.
2. ¿Es necesario concentrar el anticuerpo según el protocolo?
Para una eficacia óptima de la reacción, se recomienda concentrar el anticuerpo a la concentración sugerida en el protocolo. Si la concentración no es factible, asegúrese de que la concentración de anticuerpos se mantiene por encima de 1 mg/ml y prolongue el tiempo de reacción a 48 horas para mantener la eficacia de la conjugación.
3. ¿Este Kit de Conjugación es adecuado para anticuerpos de todas las especies?
Este kit de conjugación es muy eficaz para la conjugación de anticuerpos humanizados. Sin embargo, los anticuerpos murinos y de conejo, debido a sus estructuras complejas y a su validación incompleta, pueden requerir un tiempo de conjugación prolongado de hasta 48 horas para mejorar la eficacia de la conjugación.
4. ¿Puede hidrolizarse el enlazador del kit de conjugación AGLink® ADC y, en caso afirmativo, por qué medio?
El enlazador en el kit de conjugación AGLink® ADC (MMAE, DAR 2 & 4, 1 mg & 5 mg) es vc-PAB, que puede ser escindido por la catepsina B. La escindibilidad de los enlazadores en otros kits depende de si se utiliza un enlazador escindible durante la conjugación química. click.
5. ¿Cuál es la eficacia de conjugación del kit de conjugación y qué métodos se utilizan para detectar la relación fármaco/anticuerpo (DAR) del producto conjugado?
La eficacia de conjugación de esos kits puede superar el 90%, y el valor DAR puede analizarse mediante HIC-HPLC (MMAE) o LC-MS (MMAE/DBCO/Tetrazina/Biotina).
6. ¿Cómo almacenar el producto conjugado y su estabilidad en esas condiciones?
Se recomienda almacenar el producto conjugado en tampón PBS, donde puede conservarse durante más de seis meses a -80°C. Evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación.
7. ¿Qué entorno de laboratorio se requiere para este kit?
El kit de conjugación AGLink® puede utilizarse en condiciones normales de laboratorio. Asegúrese de utilizar equipo de protección personal (bata de laboratorio, gafas de seguridad y guantes de nitrilo resistentes a productos químicos) mientras manipula MMAE.
8. ¿Existe alguna restricción de patentes sobre este producto, y repercutirá en el desarrollo y la producción comercial de CMC?
La propiedad intelectual de nuestro kit de conjugación AGLink® está cubierta parcial o totalmente por una patente propiedad de Glyco-therapy Biotechnology Co., Ltd. o controlada por ésta. Para más información sobre los derechos comerciales, póngase en contacto con inquiry@acrobiosystems.com.
9. Si el sitio Fc N297 está mutado, ¿se puede seguir realizando la conjugación sitio-específica?
El kit de conjugación actual está diseñado para la modificación específica del sitio en los sitios glicosilados, si se elimina el sitio de glicosilación N297 Fc, este kit no se puede utilizar. Sin embargo, la conjugación sitio-específica puede lograrse utilizando métodos alternativos.
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